Új fegyver a tuberkulózis diagnosztizálására és a gyógyszerrezisztencia kimutatására: új generációs célzott szekvenálás (tNGS) gépi tanulással kombinálva a tuberkulózis túlérzékenységi diagnosztikájában
Irodalmi beszámoló: CCa: tNGS-en és gépi tanuláson alapuló diagnosztikai modell, amely kevésbé bakteriális tuberkulózisban és tuberkulózisos agyhártyagyulladásban szenvedők számára alkalmas.
A szakdolgozat címe: Tuberkulózisra célzott új generációs szekvenálás és gépi tanulás: ultra-érzékeny diagnosztikai stratégia paucific pulmonalis tubularis és tubuláris meningitis esetén.
Folyóirat: 《Clinica Chimica Acta》
HA: 6.5
Megjelenés időpontja: 2024. január
A Kínai Tudományos Akadémiával és a Pekingi Mellkasi Kórházzal együtt a Macro & Micro-Test létrehozta a tuberkulózis diagnosztizálási modelljét, amely a célzott szekvenálás (tNGS) technológia és a gépi tanulási módszer új generációján alapul, amely ultramagas teljesítményt nyújtott. kimutatási érzékenység a kevés baktériummal járó tuberkulózisra és a tuberkulózisos agyhártyagyulladásra, új túlérzékenységi diagnosztikai módszert nyújtott kétféle tuberkulózis klinikai diagnosztizálására, valamint segítette a tuberkulózis pontos diagnosztizálását, gyógyszerrezisztencia kimutatását és kezelését.Ugyanakkor azt találták, hogy a páciens plazma cfDNS-e megfelelő mintatípusként használható klinikai mintavételhez a TBM diagnosztikájában.
Ebben a vizsgálatban 227 plazmamintát és liquormintát használtak fel két klinikai kohorsz felállítására, amelyekben a laboratóriumi diagnosztikai kohorsz mintákat használták fel a tuberkulózis diagnózisának gépi tanulási modelljének felállítására, a klinikai diagnosztikai kohorsz mintákat pedig a megállapítottak igazolására. diagnosztikai modell.Minden mintát először a Mycobacterium tuberculosis számára speciálisan megtervezett, célzott befogószonda pool vette célba.Ezután a TB-tNGS szekvenálási adatok alapján a döntési fa modellel 5-szörös keresztvalidációt hajtanak végre a laboratóriumi diagnosztikai sor betanító és validációs készletein, és megkapják a plazmaminták és a gerincvelői folyadékminták diagnosztikai küszöbértékeit.A kapott küszöbértéket a klinikai diagnosztikai sor két tesztkészletébe helyezik kimutatásra, és a tanuló diagnosztikai teljesítményét a ROC görbe segítségével értékelik.Végül megkaptuk a tuberkulózis diagnosztikai modelljét.
1. ábra a kutatás tervezésének sematikus diagramja
Eredmények: A jelen vizsgálatban meghatározott CSF DNS minta (AUC = 0,974) és plazma cfDNS minta (AUC = 0,908) specifikus küszöbértékei szerint 227 minta közül a CSF minta érzékenysége 97,01%, specificitása 95,65%, ill. a plazmaminta szenzitivitása és specificitása 82,61% és 86,36% volt.A TBM-betegekből származó plazma cfDNS és liquor DNS 44 párosított mintájának elemzése során a jelen tanulmány diagnosztikai stratégiája magas, 90,91%-os (40/44) konzisztenciával rendelkezik a plazma cfDNS-ben és a cerebrospinális folyadék DNS-ében, az érzékenység pedig 95,45%. (42/44).Tüdőtuberkulózisban szenvedő gyermekeknél ennek a vizsgálatnak a diagnosztikai stratégiája érzékenyebb a plazmamintákra, mint az ugyanazon betegektől származó gyomornedvminták Xpert kimutatási eredményei (28,57% VS 15,38%).
2. ábra A tuberkulózis-diagnosztikai modell elemzési teljesítménye populációs mintákon
3. ábra Párosított minták diagnosztikai eredményei
Következtetés: Ebben a tanulmányban egy olyan túlérzékeny tuberkulózis-diagnosztikai módszert dolgoztunk ki, amely a legmagasabb kimutatási érzékenységgel rendelkező diagnosztikai eszközt nyújthatja oligobaciláris tuberkulózisban (negatív tenyészetben) szenvedő klinikai betegek számára.A hiperszenzitív tuberkulózis plazma-cfDNS alapján történő kimutatása megfelelő mintatípus lehet az aktív tuberkulózis és a tuberkulózisos agyhártyagyulladás diagnosztizálására (agytuberkulózis-gyanús betegeknél a plazmaminta könnyebben gyűjthető, mint a cerebrospinális folyadék).
Eredeti link: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/s0009898123004990?via%3Dihub
A Macro & Micro-Test tuberculosis sorozat kimutatására szolgáló termékek rövid bemutatása
Tekintettel a tuberkulózisos betegek bonyolult mintahelyzetére és a különféle igényekre, a Macro & Micro-Test az NGS-megoldások teljes készletét kínálja a köpetminták cseppfolyósítására, a Qualcomm könyvtár felépítésére és szekvenálásra, valamint az adatok elemzésére.A termékek kiterjednek a tuberkulózisos betegek gyors diagnosztizálására, a tuberkulózis gyógyszerrezisztenciájának kimutatására, a mycobacterium tuberculosis és az NTM tipizálására, a baktérium-negatív tuberkulózis és a tuberkulózisos emberek túlérzékenységi diagnosztizálására stb.
Sorozatos kimutatási készletek tuberkulózishoz és mikobaktériumokhoz:
Cikkszám | termék név | terméktesztelési tartalom | minta típusa | alkalmazható modell |
HWTS-3012 | Mintaleválasztó szer | A köpetminták cseppfolyósító kezelésében használják, első osztályú rekordszámot ért el, a Sutong Machinery Equipment 20230047. | köpet | |
HWTS-NGS-P00021 | Qualcomm mennyiségérzékelő készlet túlérzékeny tuberkulózishoz (szonda rögzítési módszere) | Nem invazív (folyadékbiopsziás) túlérzékenység kimutatása baktérium-negatív tüdőtuberkulózis és agyi csomók esetén;A tuberkulózissal vagy nem tuberkulózisos mikobaktériummal fertőzött személyek mintáit nagymélységű szekvenálási metagenomika segítségével elemezték, valamint a tuberkulózis vagy nem tuberkulózis mikobaktériumok fertőzöttségére vonatkozó kimutatási információkat, valamint a mycobacterium tuberculosis fő első vonalbeli gyógyszerrezisztencia információit. biztosították. | Perifériás vér, alveoláris mosófolyadék, hidrothorax és ascites, fókuszpunkciós minta, cerebrospinális folyadék. | Második generáció |
HWTS-NGS-T001 | Mycobacterium tipizálás és gyógyszerrezisztencia-detektáló készlet (multiplex amplifikációs szekvenálási módszer) | Mycobacterium tipizálási teszt, beleértve az MTBC-t és a 187 NTM-et;A Mycobacterium tuberculosis gyógyszerrezisztencia kimutatása 13 gyógyszerre és a gyógyszerrezisztencia gének 16 magmutációs helyére terjed ki. | Köpet, alveoláris mosófolyadék, hidrothorax és ascites, fókuszpunkciós minta, cerebrospinális folyadék. | Második/harmadik generációs kettős platform |
Főbb jellemzők: HWTS-NGS-T001 Mycobacterium tipizálás és gyógyszerrezisztencia-érzékelő készlet (multiplex amplifikációs módszer)
Termék bemutatása
A termék a WHO TB kezelési irányelveiben leírt fő első és második vonalbeli gyógyszereken, az NTM kezelési irányelveiben általánosan használt makrolidokon és aminoglikozidokon alapul, és a gyógyszerrezisztencia helyek lefedik a gyógyszerrezisztenciával kapcsolatos helyek mind egy csoportját. A WHO Mycobacterium tuberculosis komplex mutációs katalógusa, valamint más bejelentett gyógyszerrezisztencia-gének és mutációs helyek a hazai és külföldi magas pontszámot elért szakirodalom vizsgálata és statisztikái alapján.
A tipizálási azonosítás a Chinese Journal of Tuberculosis and Respiratory Diseases által kiadott NTM-irányelvekben összefoglalt NTM-törzseken és a szakértők konszenzusán alapul.A tervezett tipizáló primerek több mint 190 NTM fajt képesek amplifikálni, szekvenálni és megjegyzésekkel ellátni.
A célzott multiplex PCR amplifikációs technológiával multiplex PCR-rel amplifikáltuk a Mycobacterium genotipizáló génjeit és gyógyszerrezisztens génjeit, és megkaptuk a kimutatandó célgének amplikon kombinációját.Az amplifikált termékekből második vagy harmadik generációs nagy áteresztőképességű szekvenáló könyvtárak készíthetők, és az összes második és harmadik generációs szekvenáló platformot nagy mélységű szekvenálásnak vethetjük alá a célgének szekvenciainformációinak megszerzése érdekében.A beépített referencia adatbázisban található ismert mutációkkal (beleértve a WHO Mycobacterium tuberculosis komplex mutációs katalógusát és a gyógyszerrezisztenciával való kapcsolatát) összevetve meghatároztuk a gyógyszerrezisztenciával vagy a tuberkulózis elleni szerek érzékenységével kapcsolatos mutációkat.A Macro & Micro-Test önnyíló köpetminta kezelő megoldásával kombinálva megoldódott a klinikai köpetminták alacsony nukleinsavamplifikációs hatékonyságának (a hagyományos módszerekénél tízszeres) problémája, így a gyógyszerrezisztencia szekvenálás kimutatása megoldható. közvetlenül alkalmazzák a klinikai köpetmintákra.
Termékfelismerési tartomány
34gyógyszerrezisztenciával kapcsolatos génjei18tuberkulózis elleni gyógyszerek és6NTM kábítószert észleltek, fedő297gyógyszerrezisztencia helyek;Tízféle Mycobacterium tuberculosis és több mint190típusú NTM-eket észleltek.
1. táblázat: 18+6 drog +190+NTM információ
A termék előnye
Erős klinikai alkalmazkodóképesség: a köpetminták önfolyósító szerrel tenyésztés nélkül közvetlenül kimutathatók.
A kísérleti művelet egyszerű: az erősítési művelet első köre egyszerű, a könyvtárépítés 3 óra alatt elkészül, ami javítja a munka hatékonyságát.
Átfogó tipizálás és gyógyszerrezisztencia: lefedi az MTB és az NTM tipizálási és gyógyszerrezisztencia helyszíneit, amelyek a klinikai aggályok kulcspontjai, pontos tipizálás és gyógyszerrezisztencia-detektálás, független elemzőszoftver támogatása és elemzési jelentések létrehozása egyetlen kattintással.
Kompatibilitás: termékkompatibilitás, alkalmazkodás a mainstream ILM és MGI/ONT platformokhoz.
Termékleírás
Termékkód | termék név | Észlelési platform | specifikációk |
HWTS-NGS-T001 | Mycobacterium tipizálás és gyógyszerrezisztencia-detektáló készlet (multiplex amplifikációs módszer) | ONT, Illumina, MGI, Salus pro | 16/96rxn |
Feladás időpontja: 2024. január 23